Nel precedente progetto FFC#16/2016 i ricercatori avevano isolato ceppi di fagi (speciali virus con attività antimicrobica contro specifici batteri) capaci di infettare e uccidere P. aeruginosa in vitro. Ora intendono verificare l’azione antinfettiva di questi fagi in vivo. A questo scopo utilizzeranno un nuovo modello animale, un pesce con la pelle a strisce, chiamato per questo Zebrafish (pesce zebra). Attraverso manipolazione genetica è possibile ottenere embrioni di Zebrafish mutati, con gene CFTR non funzionante, che mostrano i sintomi respiratori e pancreatici della malattia FC umana. Questi embrioni di Zebrafish con FC verranno infettati con P. aeruginosa e, successivamente, messi a contatto con alcuni fagi. I fagi potranno infettare i batteri e causarne la morte, debellando in questo modo l’infezione. L’efficacia terapeutica dei fagi sarà quindi misurata in base alla mortalità e alla carica batterica degli embrioni di Zebrafish. Due sono i principali risultati attesi da questo studio: 1) la conferma di Zebrafish come nuovo e interessante modello animale per lo studio degli effetti della FC; 2) la possibile validazione dell’efficacia della terapia fagica per combattere le infezioni batteriche FC.
The CFTR gene is conserved in Zebrafish and the CFTR-loss-of-function zebrafish mutants mimic CF human disease. In a previous project (FFC#16/2016) researchers isolated and mixed in cocktail different phages and demonstrated they are able to infect and kill a large number of P. aeruginosa clinical strains in vitro. The subsequent step is the use of the CF-zebrafish model to validate in vivo phage therapy against P. aeruginosa infections. To this aim Zebrafish embryos both wild-type and with reduced expression of CFTR (CFTR-loss-of-function) will be infected with P. aeruginosa by static immersion or by microinjection, and incubated in water added with the phage cocktail. The therapeutic effects of phages will be measured following embryo mortality, bacterial burden, and neutrophil migration. Two are the expected results of this project: to demonstrate that zebrafish is a new CF-model that can be used for in vivo validation of therapeutic treatments relative to CF; and to give evidence that phage therapy is effective in reducing P. aeruginosa infections in vivo.
