Sono state isolate cellule endoteliali dalle arterie polmonari (PAEC) di un paziente FC con il genotipo G542X/1717-1G->A (PAEC-FC). Queste cellule esprimono bassi livelli di CFTR sulle membrane e hanno scarsa attività CFTR. Esperimenti con queste cellule hanno permesso di confermare i dati ottenuti con cellule normali trattate con un inibitore del CFTR. In particolare, se paragonate alle cellule normali, le PAEC-FC hanno mostrato più bassa resistenza transendoteliale (TER) e rilasciato più alte quantità di Fattore Vascolare di Crescita Endoteliale e un maggior numero di microparticelle (MP).I pazienti FC hanno mostrato un incremento nel numero di cellule endoteliali circolanti (CEC) e MP endoteliali (EMP); correlazioni inverse sono state osservate tra livello di CEC e EMP e indici di funzionalità respiratoria. Infine, alcuni farmaci sono risultati in grado di correggere le alterazioni della TER e dell’integrità delle PAEC-FC. Questi dati possono aiutare a comprendere meglio le cause della infiammazione polmonare nella FC, oltre che a individuare nuovi marcatori di malattia e terapie anti-infiammatorie.
Flow cytometry, confocal microscopy, siRNA, western blotting, real-time PCR, electrophysiology measurements were the used methods. Pulmonary artery endothelial cells (PAEC) from one CF patient carrying the G542X/1717-1G->A genotype (CF-PAEC) were successfully isolated. These cells express low membrane CFTR levels and very little CFTR activity compared to normal PAEC. Remarkably, experiments with these cells confirmed data obtained with normal PAEC exposed to CFTRinh-172. In particular, compared to normal PAEC, CF-PAEC displayed lower transendothelial resistance (TER); released a higher number of endothelial microparticles (MP) and higher amounts of vascular endothelial growth factor. CF patients displayed increased number of circulating endothelial cells (CEC) and microparticles (EMP) and that CEC inversely correlated with indices of respiratory function, whereas EMP positively correlated with CEC number and negatively with FVC. Finally, cAMP-increasing agents, in particular the combination of phosphodiesterase inhibitors and β2-adrenergic agonists normalized TER and monolayer integrity of CF-PAEC. These results suggest novel mechanisms of CF inflammation as well as potential biomarkers and innovative therapeutic approaches to CF lung disease.
