I ricercatori hanno individuato attraverso precedente progetto FFC (1/2014) la nuova molecola NXV per il trattamento delle mutazioni stop. Sono arrivati a NXV attraverso screening biologico e informatico di speciali librerie di molecole. Ora intendono ottimizzarla e sintetizzare alcuni analoghi; inoltre vogliono indagare il meccanismo d’azione di questi composti all’interno della cellula. L’attività di NXV sarà studiata misurando il funzionamento del canale del cloro, prima e dopo NXV, in modelli cellulari di fibrosi cistica. I modelli sono cellule ingegnerizzate in cui il gene CFTR normale è sostituito da un gene CFTR con mutazioni stop, e cellule epiteliali primarie derivate da pazienti FC. Inoltre saranno condotti test preclinici in vitro e in vivo (su modello di pesce chiamato Zebrafish) per stabilire il profilo di sicurezza del gruppo di nuove molecole sintetizzate.
Researchers aim to evaluate the functionality of the CFTR channel after treatment with a new molecule (NXV) that they identified in a precedent FFC project (1/2014). NXV was identified by computational and biological screening of special libraries and is now under patent processing. Further, the activity of a new lead molecule(s) in cells stably expressing a nonsense-CFTR mRNA (ns CFTR) in CF cellular model systems will be investigated. They also will study the supramolecular interactions among TRIDs (Translational Read-Through-Inducing Drugs), CFTR mRNA and the ribosomal A-site to identify the biological target and the mechanism of action. FRT cells engineered with the vector expressing mutagenized ns CFTR, and nonsense-CF-human broncoepithelial cells grown in the air-liquid culture system to reproduce in vitro the epithelial organization will be used. CFTR expression after treatments with the new molecules will be evaluated by biomolecular techniques; CFTR activity will be revealed by specific CFTR functionality assays. Finally, in vitro-in vivo (Zebrafish model) analysis of the safety profile for the set of synthesized molecule will complete the study.
