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Risultato Progetto: FFC#5/2016
Realizzazione di un nuovo test del sudore video-controllato per la misurazione della funzione del canale CFTR: importanza per definire la diagnosi e valutare l’efficacia di nuove terapie

Implementation of a new imaged-controlled sweat test for in vivo quantification of CFTR function: value for diagnosis and efficacy of new therapies

Perfezionato e validato un nuovo tipo di test del sudore: il bubble test, utile nelle diagnosi dubbie di fibrosi cistica e nella valutazione della risposta ai farmaci modulatori di CFTR.

Dati del Progetto

Responsabile
Teresinha Leal (Centro di Lovanio per Tossicologia e Farmacologia Applicata-LTAP, Istituto di Ricerca Clinica e Sperimentale-IREC, Università Cattolica di Lovanio)
Categoria/e
Partner
Stefano Ceri (Dipartimento di Elettronica, Informazione e Bioingegneria, Università di Milano); Nguyen-Khoa Thao (Necker-Enfants Malades Hospital, AP-HP Laboratory of General Biochemistry, Paris)
Ricercatori coinvolti
11
Durata
2 anni
Finanziamento totale
45.000 €
Adozione raggiunta
45.000 €
Obiettivi
Studiare potenzialità e applicabilità di un nuovo tipo di test del sudore (bubble test), capace di misurare la frazione...
Objectives
Researchers focused on developing an innovative sweat test (bubble test) suitable to distinguish CFTR-dependent from CFTR-indipendent sweat gland secretion....

Risultati

Il sudore è secreto dalla ghiandola sudoripara attraverso varie proteine-canale, fra cui la proteina CFTR. Questo progetto si è dedicato allo viluppo del bubble test, un nuovo test che misura specificatamente quanto sudore viene secreto a livello del glomerulo della giandola sudoripara nella sola frazione dipendente dal funzionamento della proteina canale CFTR. Questo sudore CFTR-dipendente, in seguito a un’iniezione intradermica di una sostanza stimolante le terminazioni nervose del sistema simpatico, si manifesta in forma di bollicine (bubble) sulla cute che, con apposita tecnica ottica, vengono contate. L’ipotesi dei ricercatori è che il nuovo test sia più sensibile del test classico (che misura invece la concentrazione di cloro e sodio nel sudore totale, pure dipendente da CFTR in massima parte) e sappia distinguere i malati FC dai portatori sani e dai sani, proprio perché analizza esclusivamente il funzionamento di CFTR nella sua azione di secernere sudore e non tanto in quella di risparmiare elettroliti (a livello del dotto escretore della ghiandola). Questo è stato confermato su piccola casistica dal gruppo di ricerca di Verona, che ha anche messo a punto una modalità di interpretazione del risultato del test. Per quanto riguarda la risposta ai famaci modulatori di CFTR, lo stesso gruppo, assieme a quello francese-belga, si è dedicato a studiare con il nuovo test la variazione del cloro nel suore dopo somministrazione di questi farmaci, con risultati promettenti. Infine il gruppo francese-belga sta conducendo un’altra parte dello studio finalizzata a confrontare il bubble test con altro test innovativo (test con evaporimetro) anch’esso comunque finalizzato a misurare nel sudore solo il flusso CFTR-dipendente. La prospettiva è quella di introdurre nella pratica clinica un nuovo test del sudore più sensibile dell’attuale, utile nelle diagnosi dubbie di FC e nella valutazione della risposta ai farmaci modulatori di CFTR.

Results

The Verona center has recently published data confirming the approximately linear readout of CFTR function obtained in bubble tests performed in three groups (CF subjects, CF carriers and non-CF controls, n = 22 in each group). Results showed that all groups were clearly discriminated, with sensibility and specificity ranging from 82% to 100%. The Verona group recently reported data on a new Optical Sweat Rate Beta Adrenergic (OSRBA) test for measuring sweat rates in individual human sweat glands based on a multilinear regression model. It showed that the volume of sweat secretory glands discriminated between CFTR genotypes and allowed quantifying the efficacy of pharmacological treatments with CFTR modulators; i.e. lumacaftor/ivacaftor (Orkambi) or PTC 124 (Ataluren). The increased sensitivity of bubble imaging may be required to detect small but physiologically important increases in secretion rates produced by CFTR modulators. The Brussels center had success in the development of a non-invasive version of the test by iontophoresis of the pharmacological agents used, which is particularly challenging for those triggering the β-adrenergic phase of the test. Interim results obtained from 10 patients with CF, 29 healthy subjects and 1 CF carrier confirmed the good discriminative power of the test. In conclusion, researchers gave data during this project that, either under intradermal injections or iontophoresis, the sweat droplet (bubble) test is able to fully discriminate between CF, non-CF and healthy subjects. Further comparative studies between measurements of bubble volumes and of water evaporated during sweat are ongoing.


Pubblicazioni

– Bergamini G, Tridello G, Calcaterra E et al “Ratiometric sweat secretion optical test in cystic fibrosis, carriers and healthy subjects” Journal of Cystic Fibrosis, 2018 Mar;17(2):186-189

Congress abstracts

– Teresinha L., Viphonephom P., Hoyep Tchanchou A. et al. “False-positive beta-sweat secretion test” The 30th Annual North American Cystic Fibrosis Conference, Orlando, Florida, October 27–29, 2016
– Calcaterra E, Tridello G, Leal T et al. “Sviluppo di un test della funzione CFTR in vivo: misurazione in ghiandole sudoripare umane mediante immagini della sudorazione dipendente dal canale difettoso in fibrosi cistica rispetto a quella indipendente” Congresso Nazionale SIFC, 9-11 Novembre 2016, Salerno
– Bergamini G, Calcaterra E, Ceri S et al “Testing CFTR function in vivo by imaged ratiometric measurement of beta-adrenergic/cholinergic sweat rate in human sweat glands” 17th Scientific Meeting “”Organoids as models for disease and treatment in CF, September 21st + 22nd 2017 Schloss Waldhausen/Mainz
– Leal T, Noel S, Bergamini G et al “Topical eye treatment with β-blocker abolishes sweat secretion triggered by intradermal isoprenaline plus aminophylline: a clinical observation” ECFS 40th European Cystic Fibrosis Conference, 7-10 Giugno 2017, Siviglia, Spagna
– Reynaerts A, Melotti P, Vermeulen F et al “Implementation d’une version non-invasive, controlee par imagerie, du test de secretion β-adrénergique de la suer: aide au diagnostic et marquer d’efficacité thérapeutique” 19e Édition du Colloques français des jeunes chercheurs en Mucoviscidose, Paris, Institut Pasteur, 20 février 2018
– Reynaerts A, Melotti P, Vermeulen F et al “Non-invasive image-controlled β-adrenergic sweat test by iontophoresis” 12th Cystic Fibrosis European Young Investigators’ Meeting (EYIM), Paris, Institut Pasteur, 21-23 February 2018
– Melotti P, Lecca P, Esposito V et al. “Measurements of beta-adrenergic vs cholinergic sweat rates in single human sweat glands” North American Cystic Fibrosis Conference (NACF), October 18-20, 2018, Denver, CO, US