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Risultato Progetto: FFC#13/2016
Messa a punto di un modello single‐cell e di un modello animale per lo studio della patogenesi dell’infezione da membri del Mycobacterium abscessus complex in pazienti con fibrosi cistica

Establishment of single‐cell and animal model to investigate pathogenesis of infection by Mycobacterium abscessus complex members in cystic fibrosis patients

Realizzato nuovo modello murino con infezione polmonare cronica da Mycobacterium abscessus per identificare i ceppi patogeni che necessitano di trattamento antibiotico.

Dati del Progetto

Responsabile
Enrico Tortoli (Unità Batteri Patogeni Emergenti, Divisione di Immunologia, Trapianti e Malattie Infettive, Istituto Scientifico San Raffaele, Milano)
Categoria/e
Partner
Carla Colombo (Centro Lombardo FC. Fondazione IRCSS Ca' Granda, Ospedale Maggiore Policlinico, Milano); Maria Clelia Di Serio (CVSSB, Università Vita-Salute San Raffaele, Milano)
Ricercatori coinvolti
12
Durata
1 anno
Finanziamento totale
50.000 €
Adozione raggiunta
50.000 €
Obiettivi
L’infezione polmonare da Mycobacterium abscessus (MA), uno dei più frequenti micobatteri non tubercolari isolati nell’escreato di pazienti con FC,...
Objectives
Mycobacterium abscessus (MA) has an increasing prevalence in CF lung and a large diversity in its clinical presentation. The...

Risultati

Non sono attualmente disponibili modelli animali per lo studio dell’infezione del micobatterio non tubercolare Mycobacterium abscessus (MA) in FC. Perciò i ricercatori hanno utilizzato tre diversi ceppi di Mycobacterium abscessus (MA) per infettare linee di topi (modello C57Bl/6NCr), riuscendo a ottenere topi con infezione polmonare cronica da MA (osservazione fino a 75 giorni). Il polmone del topo ha mostrato bassa eliminazione del batterio, con carica batterica alta e costante per tutta la durata dell’infezione; è stato così possibile studiare la risposta infiammatoria su liquido bronco alveolare ed eseguire indagine istopatologica, che ha evidenziato lesioni granulomatose caratteristiche dell’infezione da MA. Grazie al progetto di estensione FFC 20/2017, 6 ceppi di MA isolati da pazienti FC cronici (3 sintomatici e 3 asintomatici) saranno testati nel nuovo modello murino. I risultati saranno correlati allo studio dei dati genomici (il genoma è l’insieme dei geni) dei diversi ceppi di MA, per identificare i possibili fattori di virulenza. La prospettiva è di poter individuare nel modello murino i ceppi di MA che causano malattia polmonare severa e che necessitano di trattamento antibiotico precoce.

Results

In this study researchers studied chronic infection by Mycobacterium Abscessus in C57Bl/6NCr mice: mice were monitored for body weight, mortality and lungs were processed for microbiological analysis, inflammatory response and histological evaluation.
The results demonstrated that Mycobacterium Abscessus modified agar beads preparation from the standard protocol was able to establish a chronic infection in mice C57Bl/6NCr up to 75 days with MA sspp abscessus, bolleti and massiliense, with a low rate of clearance. The analysis of the bacterial load in the total lung showed a high and stable number of colony forming unit during the course of infection with minimal systemic spread and stable inflammatory response in broncoalveolar lavage fluid (BALF) up to 75 days of infection. Lung histopathological analysis revealed granulomatomatous response with lymphocytes and macrophage aggregation that are disseminated in the lung during the course of MA infection. Through extension project FFC#20/2017, six MA strains, belonging to the three sspp and isolated both from chronic symptomatic and asymptomatic CF patients, will be tested in murine model of chronic lung infection. The availability of a murine model for MA chronic infection will allow the identification of strains causing severe pulmonary disease and to evaluate in vivo novel antimycobacterial protocols.